Puromycin Dihydrochloride (嘌呤霉素)

基本信息

       Puromycin是來源于Streptomyces alboniger的一種氨基核苷類抗生素，中文名為嘌呤霉素，常用于篩選通過質粒轉染/轉化、病毒感染等方法能表達pac基因(puro^r)的真核或原核多克隆或單克隆細胞。Puromycin不僅用于穩定細胞株的篩選，也用于穩定細胞株的維持。本產品的10mg/ml包裝經過濾除菌，可以直接用于細胞培養。

      Puromycin的特點是快速作用于細胞，一般2天內可以殺死99%的不表達pac基因的細胞。
      在革蘭氏陽性菌、動物或昆蟲細胞中，嘌呤霉素通過抑制蛋白質合成而抑制或殺死細胞。其作用機制為嘌呤霉素是氨酰-tRNA分子3'末端的類似物，能夠與核糖體的A位點結合并摻入到延伸的肽鏈中。嘌呤霉素與A位點結合后，不會參與隨后的任何反應，從而導致蛋白質合成的提前終止并釋放出C-末端含有嘌呤霉素的不成熟多肽。
      Pac基因表達嘌呤霉素N-乙酰轉移酶(Puromycin N-acetyl-tranferase)，該基因是在Streptomyces alboniger中發現的。如果表達基因，就會對嘌呤霉素產生抗性，這一特性目前普遍應用于篩選表達pac基因的哺乳動物穩定細胞株等。例如，很多商業化的慢病毒載體都攜帶pac基因(一般在質粒圖譜上標記為puro^r)，從而利用嘌呤霉素篩選特定基因的穩定表達細胞株。嘌呤霉素也可以用來篩選表達pac基因的大腸桿菌菌株、酵母菌株等。