品名：GenXion® Transfection Reagent 2000

貨號(hào)：GXL2000 

規(guī)格：1ml 

價(jià)格：￥600元

產(chǎn)品簡介

GenXion® Transfection Reagent 2000是一種新型的陽離子脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑。適合于將核酸(DNA 和RNA)轉(zhuǎn)染入真核細(xì)胞，具有低細(xì)胞毒性；對(duì)多種類型的細(xì)胞和培養(yǎng)板都具有高轉(zhuǎn)染效率；轉(zhuǎn)染時(shí)血清的存在不影響轉(zhuǎn)染效率的優(yōu)點(diǎn)。

適用范圍: 貼壁細(xì)胞和懸浮細(xì)胞（晡乳動(dòng)物細(xì)胞系）的轉(zhuǎn)染。

保存條件

4-8℃ 保存一年。（避免冷凍）

質(zhì)粒DNA的轉(zhuǎn)染

對(duì)大多數(shù)細(xì)胞來說，DNA(μg)與GenXion® Transfection Reagent 2000 (μl)的比例為 1:2~1:3。轉(zhuǎn)染時(shí)高的細(xì)胞密度可以得到高的轉(zhuǎn)染效率和表達(dá)水平，并能減少細(xì)胞毒性。

1. 以24 孔板為例

貼壁細(xì)胞：轉(zhuǎn)染 diyitian ，用500 μl 不含 kangshengsu 的培養(yǎng)基接種0.5?2X105  細(xì)胞，使之 diertian 能達(dá)到70-90%匯合。

懸浮細(xì)胞：在準(zhǔn)備DNA-GenXion® 復(fù)合物之前，用500 μl 不含 kangshengsu 的培養(yǎng)基接種4?8X105  細(xì)胞即可。

2. 對(duì)每個(gè)轉(zhuǎn)染樣品，進(jìn)行以下操作

a. 在Eppendorf 管里分別加入50 μl 〇pti-MEM I Reclipped Serum Medium 和0.8 μg DNA 輕柔混勻，制成DNA 稀釋液。

b. 在另一個(gè)Eppendorf 管里分別加入50μl OpTi-MEMI Reclipped Serum Medium 和2.0 μl GenXion®(注意用前先混勻)，輕柔混勻制成GenXion® 稀釋液，室溫靜置5 分鐘。

c. 將DNA稀釋液和GenXion® 稀釋液混合，輕柔混勻，室溫靜置20 分鐘，形成DNA-GenXion® 復(fù)合物。DNA-GenXion® 復(fù)合物在室溫下可穩(wěn)定存在6 小時(shí)。

3. 將DNA-GenXion®  復(fù)合物加入到接種好的細(xì)胞中，將培養(yǎng)板輕輕地前后搖動(dòng)，使復(fù)合物分散均勻。

4. 在37C CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)4-6 小時(shí)后更換培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng)18?48 小時(shí)。

5. 如果要篩選穩(wěn)定細(xì)胞株，則在轉(zhuǎn)染24 小時(shí)后將細(xì)胞按照1:10 或更高的比例接種到新鮮培養(yǎng)基中，diertian 加入選擇性培養(yǎng)基進(jìn)行篩選。

質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染的優(yōu)化

為達(dá)到 zuigao 的轉(zhuǎn)染效率和降低細(xì)胞毒性的影響，可以對(duì)DNA和GenXion® Transfection Reagent 2000的比例以及細(xì)胞密度進(jìn)行優(yōu)化，一般在1:0.5?1:5 的范圍內(nèi)優(yōu)化 DNA (μg)和GenXion® Transfection Reagent 2000的比例。